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重组技术

鳕鱼热敏型UNG酶(Cod UNG)

   热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶是来自鳕鱼(Atlantic Cod)的热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶,能有效地水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,产生缺尿嘧啶的位点,Cod UNG对RNA无活性,主要应用于PCR扩增产物的防污染

概述:

   Cod UNG是重组大西洋鳕鱼尿嘧啶-DNA糖基化酶,是一种用于分子生物学研究和诊断的具有热不稳定特性的酶。该酶的关键特征是在低温下有较高活性,热处理之后能够快速,完整,不可逆的失活。与其他可用的UNG酶相比,Cod UNG在热灭活后不会重新激活,因此既能够处理PCR残留污染问题又不会降解后续产物,这使得PCR产物的下游使用成为可能。

Cod UNG水解DNA中脱氧核糖和尿嘧啶碱基之间的N-糖苷键并在DNA中留下嘧啶位点,而对RNA中的尿嘧啶没有活性。

用 途:

  来源于鳕鱼Atlantic Cod的热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UNG)在55℃条件下5 min即完全不可逆地失去活性。因此PCR扩增前,在PCR混合液中添加Cod UNG,25℃ 10 min即可消除PCR产物的残留,接下来的PCR循环中94℃变性便可将其灭活,不会影响新的含dU PCR产物的产生。

• 去除单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基

• 去除PCR残存污染

特 点:

• 热不稳定
• 完全不可逆地失活
• 在qRT-PCR和qPCR中具有很高的应用优势
• PCR后不会降解PCR产物
• 不含核酸酶污染,纯度高

产品规格:

货号浓度规格
ZS105S1U/μL100 U
ZS105M1U/μL500 U
ZS105L1U/μL10000U

储存溶液:

酶贮存于:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.1% Triton X-100, 50 %甘油, pH7.5 @ 25℃。

反应Buffer :

Cod UNG与绝大多数的PCR聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在离子浓度>100 mM的条件下活性会受到抑制。

活性定义:

在标准反应体系下,37℃ 1min催化60 pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需要的酶量为一个活性单位。

来 源:

来自于E.coli菌株;应用基因重组技术将Atlantic Cod-DNA糖基化酶基因在E.coli菌株中进行表达纯化获得的重组蛋白。

保存条件:

-20℃保存,避免重复冻融。

热失活:

55℃灭活5分钟。

使用注意事项:

Cod UNG在高离子浓度条件下活性会受到抑制。

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