上海仲朔生物科技有限公司

                                                           HPV假病毒（HPV pseudovirus）产品说明书

【产品信息】                              

【产品规格】

 规格：100μL

参考稀释倍数：1：100-1：1000

                 【产品介绍】

人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，简称 HPV） 主要通过人体密切接触，如性传播的病毒，可引起人类多种增殖性上皮病变，包括乳头状瘤（疣）和瘤样病变，其所引发的相关致死性的恶性肿瘤和多种传播疾病对人类健康具有严重的危害性。HPV的中和抗体水平是HPV 相关研究开发的关键性指标。

仲朔生物从 Genbank 公开的 HPV L1和 L2基因序列中选取相关基因，构建基因表达质粒，再和基因报告质粒共转染293FT细胞构建了HPV的假病毒。该病毒含有HPV病毒的衣壳蛋白，病毒内包裹绿色荧光蛋白（GFP）的DNA序列。

                                                  【预期用途】

              可以用于HPV抗血清或者中和抗体滴度检测

                 【主要成分】

  DPBS-Mg，tritonx-100，硫酸铵， protein inhibitor，血清蛋白，假病毒

                                      【存储条件及有效期】

                冻存于-75±5℃以下，有效期大于12个月。

                    【使用方法】

1.收集对数生长期的293FT细胞，计数，用DMEM完全培养液稀释细胞浓度至1.5x105个／mL。将细胞接种于96孔细胞培养板中，100μ1／孔。放C02培养箱中孵育4-6h后用于假病毒的感染。

2．假病毒稀释：取出冻存的假病毒置于冰上融化或4±1℃或常温条件下自然融化，待其完全融化后，将假病毒使用DMEM完全培养基（含10％胎牛血清）稀释到工作浓度。因假病毒对不同细胞的感染效率不同，正式实验前建议进行预实验，以确定最适病毒量。

3．待测样品和假病毒预混：取96孔细胞培养板，每孔加入55μ1样品和55μ1假病毒稀释液，轻拍四周混匀，同时设完全培养液替代样品假病毒对照孔和无样品无假病毒的空白对照孔。

4．待测样品和假病毒混合液预孵育：将96孔培养板4℃冰箱放置1小时。

5．假病毒感染：从96孔培养板各孔中吸取100uL的假病毒和待测样品组合物及对照，贴壁缓缓加入提前已铺好细胞的培养板对应孔中，轻拍培养板四周混匀。

6．感染检测：细胞感染假病毒第三天，通过观察绿色荧光蛋白表达的活性判定感染效率。

7．为了更好的保持产品活性，假病毒产品尽量减少反复冻融，建议客户收到产品后，使用DMEM完全培养基（含10％的胎牛血清）稀释到1ml，然后分装成50μ1的小包装后冻存于-75±5℃保存，分次使用（也可以依据客户自身实验需要进行分装）。

                    【注意事项】

1．我们提供的HPV假病毒为复制缺陷型病毒，即该病毒感染目的细胞后不会利用宿主细胞产生新的病毒颗粒；

2．实验操作需要在生物安全柜条件下进行，并穿戴好实验服、口罩和手套等个人防护用品；

3．如果实验时本品不慎溅出，请立即使用84消毒液对其进行灭活处理，如果溅到眼睛、皮肤或其他身体部位请立即使用大量清水冲洗；

4．使用本品所产生的实验废弃物需要通过高压灭菌处理后按照医疗废弃物处理要求进行处理。