1.产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 |
| SUMO蛋白酶 | ZS00021ES25 | 25KU |
| ZS0002ES50 | 50KU | |
| ZS0002ES100 | 100KU |
2.产品描述
SUMO 蛋白酶(也称为 Ulp)是酿酒酵母中 ULP1(Ubl 特异性蛋白酶 1)的重组片段。其对 SUMO 蛋白融合具有高度特异性,识别 SUMO 的三级结构而不是氨基酸序列。SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。
3.产品性质
| 来源 | E.coli |
| 分子量(Molecular Weight) | 26.55 kDa |
| 纯度(Purity) | ≥90%、≥95% |
| 酶活(Enzyme Activity) | 200-250U/ul |
| 比活(Specific Actiity) | ≥1.5x106 U/mg蛋白 |
| 储存缓冲液(Storage Buffer) | 500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT |
| 活性单位定义(Unit Definition) | 30℃,SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。 |
4. 使用方法
4.1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)
组分 体积
融合蛋白 20 ug
10X SUMO Protease Buffer 20 μL
ddH2O to 190 μL
SUMO Protease 10 μL
Total volume 200 μL
4.2. 30℃孵育,在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液,置于单独的EP管中。
4.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
4.4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取少量进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理,推荐将反应液置于4℃过夜反应,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。
4.5.若要去除酶切后体系中的SUMO蛋白酶,可用His标签纯化树脂亲和层析。
5. 储存条件
长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃。
6. 产品优势
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
注意事项:
1、 为达到最好的酶切效果,请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白;
2、 对于大部分融合蛋白,SUMO蛋白酶最理想的反应液中NaCl的浓度为150mM。然而,根据实际情况可在100 mM -300 mM 之间调节NaCl的浓度以达到最佳的效果。实验中要考虑融合蛋白中盐的浓度;
3、 咪唑的浓度应低于150mM,若高于该浓度会影响SUMO蛋白酶的活性。
本品仅用于科研。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品。