上海仲朔生物 重组酶与重组蛋白 专业制造商 专注磷脂酶D | 重组胰蛋白酶 | 人源胶原蛋白 | 定制蛋白技术服务

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产品
5大
应用领域
GMP
标准
100%
重组技术

1.产品信息

产品名称产品编号规格
SUMO蛋白酶ZS00021ES2525KU
ZS0002ES5050KU
ZS0002ES100100KU

2.产品描述

SUMO 蛋白酶(也称为 Ulp)是酿酒酵母中 ULP1(Ubl 特异性蛋白酶 1)的重组片段。其对 SUMO 蛋白融合具有高度特异性,识别 SUMO 的三级结构而不是氨基酸序列。SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。

3.产品性质

来源E.coli
分子量(Molecular   Weight)26.55 kDa
纯度(Purity)≥90%、≥95%
酶活(Enzyme Activity)200-250U/ul
比活(Specific   Actiity)≥1.5x106   U/mg蛋白
储存缓冲液(Storage Buffer)500 mM Tris-HCl,   pH 8.0、2%   Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10   mM DTT
活性单位定义(Unit Definition)30℃,SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。

4. 使用方法

4.1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)

组分                         体积

融合蛋白                     20 ug

10X SUMO Protease Buffer     20 μL

ddH2O                        to 190 μL

SUMO Protease                 10 μL

Total volume                  200 μL

4.2. 30℃孵育,在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液,置于单独的EP管中。

4.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。

4.4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取少量进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。

【注】如融合蛋白要求低温处理,推荐将反应液置于4℃过夜反应,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。

4.5.若要去除酶切后体系中的SUMO蛋白酶,可用His标签纯化树脂亲和层析。

5. 储存条件

长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃。

6. 产品优势

无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。

纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。

注意事项:

1、 为达到最好的酶切效果,请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白;

2、  对于大部分融合蛋白,SUMO蛋白酶最理想的反应液中NaCl的浓度为150mM。然而,根据实际情况可在100 mM -300 mM 之间调节NaCl的浓度以达到最佳的效果。实验中要考虑融合蛋白中盐的浓度;

3、  咪唑的浓度应低于150mM,若高于该浓度会影响SUMO蛋白酶的活性。

本品仅用于科研。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品。

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